PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一項(xiàng)廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代生物學(xué)研究中的技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增特定DNA序列。96孔PCR板是其中重要的實(shí)驗(yàn)器材之一,下面將介紹在其使用過程中需要注意的事項(xiàng)。
1、預(yù)處理
在進(jìn)行PCR前,首先需要對96孔PCR板進(jìn)行預(yù)處理。因?yàn)樾轮苽涑鰜淼墓饣芰媳砻嫱ǔ2蝗菀着c試劑液接觸并形成表面張力導(dǎo)致反應(yīng)效率低下。因此,在使用前我們需要經(jīng)過去臟、消毒和干燥等步驟。
2、填充
填充樣本時(shí),保持操作臺整潔嚴(yán)肅;避免交叉污染;同時(shí)也需留意分配均勻樣品量準(zhǔn)確無誤以及所選取植物組織是否具有代表性。
3、加蓋
加蓋后需輕輕壓平所有井至水平狀態(tài),并檢查各井間距是否相等,看上去像個(gè)正方形或者長方形而不是歪歪扭扭.
4、溫度控制
PCR過程中溫度較高,超出了許多試劑/化合物和工具質(zhì)量可承擔(dān)的高溫范圍。因此,在實(shí)驗(yàn)過程中,必須要嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度,并進(jìn)行恰當(dāng)?shù)睦鋮s。
5、反應(yīng)液體積
在加入反應(yīng)液時(shí),不要超出PCR板孔口的限制。另外還需注意各孔內(nèi)反應(yīng)液量是否均勻,避免空氣泡等情況影響擴(kuò)增效果。
6、重復(fù)利用問題
為了更好地節(jié)約資源并保障環(huán)境安全,實(shí)驗(yàn)室能否將96孔PCR板回收再利用?盡管這聽起來是一種可行性較高且環(huán)保的選擇,但是需要確保清晰化學(xué)物質(zhì)殘留和消毒處理后再次使用;同時(shí)也需確保沒有任何污染或誤差會對下一輪實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾影響.
總之,在使用96孔PCR板時(shí),我們必須非常仔細(xì)地操作每一個(gè)步驟以及精準(zhǔn)完成每個(gè)試劑藥品投料分配比例、時(shí)間點(diǎn)所指定任務(wù);這樣可以幫助我們避免很多潛在風(fēng)險(xiǎn)和錯(cuò)誤從而提供結(jié)果!